我国食用菌菌种分离技术及发展现状的可行性研究

第一节 食用菌菌种的定义

来源于自然界大量的食用菌，从中经分离并筛选出有用菌种，再加以改良，贮存待用于生产。 原意是指孢子（相当于植物的种子），但在实际生产中，常将经过人工培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种。我国食用菌菌种分离技术及发展现状的（可行性 研究 ）。

第二节 食用菌菌种分离技术

一、组织分离法

组织分离法是通过切取菌索、子实体、菌核的新鲜幼嫩的组织进行分离，以获取纯菌丝的方法，是最常用的菌种分离法之一 。子实体、菌索等实际就是双核菌丝的纽结物，具有很强的再生能力。因分离时所 选择的材料不同 ，该方法又可分为菌索组织分离法、子实体组织分离法及菌核组织分离法。在实践中，子实体组 织分离法是最有效、最常用的方法。但对于胶质菌，由于其子实体中所含的菌丝量比较低 ，如黑木耳、银耳等，利用组织分离培养难度较大。组织分离属于无性繁殖的范畴，能保持原菌株的特性，遗传稳定变异小，不仅适于孢子不易收集或萌发的食用菌，也适于稳定优良品种的遗传性。

二、孢子分离法

孢子分离法，是采取子囊果或子实体中成熟的子囊孢子或有性孢子萌发成纯菌丝，再进一步培养成菌种的方法。由此法可以获得强活性、短菌龄的菌丝，该方法的另外一个优点是分离得到的有性孢子兼有双亲的遗传特性，可用于杂交育种和选育新种中。只是孢子间不仅存在个体差异，还存在较普遍的自然分化现象，出现的变异较大，必须经过出菇试验后才能用于生产中团。对于产孢子的真菌，一般其分离法多采用孢子分离法。

1.种菇选择与处理

在选择种菇时，选取个体典型、大小适中均匀、健壮无杂且成熟度8成的子实体。将选好的种菇的杂物去除，并切除菇柄。用75%酒精抹擦菇体，或用0。1%升汞浸泡1min(银耳、木耳类胶质菌的子实体只能用无菌水多次冲洗)。然后用无菌水冲洗种菇表面的残留药液。用无菌纱布拭干表面水分，并放入灭菌的器皿内备用。

2.孢子采集

根据采集孢子的方法不同，又可分为以下几种。在用弹射法时，先安装已灭菌的孢子采集器，将经过处理的种菇菌褶朝下固定于三角架(采集器上)之上，扣上罩子，接着用0。1%升汞溶液润湿纱布并铺在培养皿的四周，既能防杂菌污染，又能增加罩内的湿度。最后再将整个采集器用灭菌的纱布覆盖，在适温漫射光条件下培养12～20h，待孢子散出，选择在无菌的条件下将落有孢子的培养皿进行培养。钩悬法是银耳、木耳等无菌柄类食用菌生产上常用的孢子采集法。取一金属针两头做成钩状，经火焰灼烧后一端固定于锥形瓶上，另一端钩住食用菌的子实体，塞上棉塞，于无菌环境中室温搁置约2d，见瓶底有落下的孢子，即除去悬钩和子实体备用。孢子收集的方法有很多，除了上述方法外，还有贴附法、印模法等。

3.孢子分离

孢子分离有2种，分别为多孢分离和单孢分离，都是先收集孢子再经过分离选择，最终制成可供生产使用的菌种。其中多孢分离在生产使用较为普遍，如银耳、香菇、黑木耳等异宗结合的食用菌。它们的孢子有性别之分，单个孢子生产的菌丝无法结菇，因此需要把多个孢子接种在同一培养基上，发菌丝后自然交配，经挑选得到纯种，该操作简单易行。而蘑菇、草菇等孢子无性别区分，结实能力较强，单个孢子萌发即获得纯菌种。但生产上使用的食用菌同宗结合的种类相对较少，因此单孢分离多用于育种，生产上很少采用。

三、基内菌丝分离法

从食用菌生长基质中分离选择获得纯菌种的方法叫基内菌丝分离法。如可利用菇木、耳木、菌棒及土壤等作为分离材料进行分离。此法操作较复杂，但适宜不易采得子实体、错过子实体发生时期的菌类或胶质菌的菌种分离。使用此法时要特别注意，干燥耳木或菇木中的菌丝多处在休眠期。接种后有时需恢复25～30d才能断定菌丝是否能恢复活性。

第三节 国内食用菌菌种现状

一、种植品种多、范围广

我国是世界上人工栽培食用菌最早的国家，食用菌种类繁多，野生食用菌数量超过2000种，驯化后的种类超过100种，商品化的种类超过60种。从1980年开始食用菌种植走向快速发展阶段，经过近30年大的发展已经逐步形成了不同特色区域：南方福建银耳、双孢蘑菇栽培，上海工厂化金针菇、真姬菇栽培，浙江香菇、双孢蘑菇等栽培；北方黑、吉、辽地区的黑木耳、滑子菇等栽培；中部地区山东、河南、河北、湖北、安徽的平菇、双孢蘑菇、香菇、毛木耳等栽培。中国食用菌种植规模和产量已经成为世界最大的国家之一，据2012年中国食用菌产业发展大会资料介绍，中国食用菌产量占到全球总产量70%以上，排名世界第一。

二、品种乱

实际生产中由于手工栽培者的不规范引用、自繁、代繁、串种，导致品种随意冠名，国内很多地方出现同物异名和同名异物现象，菌种质量下降，严重影响种植者的经济效益，成为制约我国食用菌产业发展的重要瓶颈问题。

三、逐步走向规范化

在各级政府、食用菌科技工作者的共同努力下，食用菌生产逐步向规范化方向发展。2006年，农业部颁布食用菌菌种管理办法，规范了食用菌菌种的种质资源、良种选育、生产与流通、质量与监督等的要求与管理。在菌种保藏方面国内也逐步建立了知名的食用菌菌种保藏中心：中国农业微生物保藏中心食用菌分中心（上海市农业科学院）、农业部微生物肥料和食用菌菌种质检中心建立的国家食用菌标准菌株库，（挂靠中国农业科学院农业资源与农业区划 研究 所，是农业部认定的食用菌菌种保藏机构）、福建农业大学菌物中心（福建农林大学）、中国西南野生生物种质资源库（中国科学院昆明植物 研究 所）、福建三明真菌 研究 所、黑龙江省科学院微生物 研究 所食用菌 研究 中心（黑龙江省科学院微生物 研究 所）等。2002年起省级的菌种保藏中心也开始逐步建立；2002年山东省成立了食用菌菌种保藏中心，2010年河南省成立了食用菌菌种保藏中心。

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